準(zhǔn)備工作:在使用前,將 CHT4-SD100-002 細(xì)胞計(jì)數(shù)板和蓋玻片用 75% 乙醇擦拭干凈,然后用無塵紙擦干,確保計(jì)數(shù)板表面無污漬和雜質(zhì)。同時(shí),準(zhǔn)備好細(xì)胞懸液,并根據(jù)細(xì)胞濃度進(jìn)行適當(dāng)稀釋,使細(xì)胞密度適中,便于計(jì)數(shù)。
加樣操作:將蓋玻片輕輕放置在計(jì)數(shù)板的凹槽上,確保蓋玻片與計(jì)數(shù)板緊密貼合,形成計(jì)數(shù)室。用微量移液器吸取適量的細(xì)胞懸液,將移液器的槍頭靠近計(jì)數(shù)室邊緣,緩慢滴加細(xì)胞懸液,使細(xì)胞懸液通過毛細(xì)作用自動(dòng)充滿計(jì)數(shù)室。注意不要讓細(xì)胞懸液溢出計(jì)數(shù)室,也不要產(chǎn)生氣泡,以免影響計(jì)數(shù)結(jié)果。
顯微鏡觀察與計(jì)數(shù):將加樣后的計(jì)數(shù)板放置在顯微鏡載物臺(tái)上,先用低倍物鏡(如 10 倍物鏡)找到計(jì)數(shù)室的位置,然后轉(zhuǎn)換到合適的高倍物鏡(如 20 倍物鏡)進(jìn)行觀察。按照計(jì)數(shù)原則,對(duì)計(jì)數(shù)室內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),并記錄每個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)域的細(xì)胞數(shù)量。
數(shù)據(jù)計(jì)算與分析:根據(jù)計(jì)數(shù)結(jié)果,使用上述計(jì)數(shù)公式計(jì)算細(xì)胞懸液的濃度。為了提高數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,可以對(duì)多個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)域進(jìn)行計(jì)數(shù),并計(jì)算平均值。同時(shí),記錄實(shí)驗(yàn)過程中的相關(guān)信息,如細(xì)胞來源、培養(yǎng)條件、稀釋倍數(shù)等,以便后續(xù)數(shù)據(jù)分析和實(shí)驗(yàn)總結(jié)。
樣品處理:細(xì)胞懸液的制備質(zhì)量直接影響計(jì)數(shù)結(jié)果。在制備細(xì)胞懸液時(shí),要確保細(xì)胞充分分散,避免細(xì)胞團(tuán)聚。可以通過輕柔吹打、振蕩等方式使細(xì)胞均勻分布。同時(shí),對(duì)于一些容易貼壁的細(xì)胞,在消化過程中要掌握好消化時(shí)間和消化液濃度,防止細(xì)胞損傷或消化。
加樣技巧:加樣時(shí)要注意操作手法,避免產(chǎn)生氣泡和液體溢出。如果計(jì)數(shù)室中出現(xiàn)氣泡,會(huì)導(dǎo)致計(jì)數(shù)區(qū)域內(nèi)細(xì)胞數(shù)量不準(zhǔn)確;而液體溢出則會(huì)污染計(jì)數(shù)板和顯微鏡載物臺(tái),影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。此外,加樣后要靜置片刻,讓細(xì)胞沉降到計(jì)數(shù)室底部,再進(jìn)行顯微鏡觀察,以獲得更準(zhǔn)確的計(jì)數(shù)結(jié)果。
清潔與保養(yǎng):使用完畢后,立即將計(jì)數(shù)板和蓋玻片進(jìn)行清洗。先用清水沖洗掉殘留的細(xì)胞懸液,然后用 75% 乙醇浸泡消毒,最后用無塵紙擦干并妥善保存。避免使用硬物刮擦計(jì)數(shù)板表面,防止損壞計(jì)數(shù)室的刻度和結(jié)構(gòu)。定期對(duì)計(jì)數(shù)板進(jìn)行校準(zhǔn)和檢查,確保其計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性。
生命科學(xué)研究:在細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等基礎(chǔ)研究領(lǐng)域,CHT4-SD100-002 細(xì)胞計(jì)數(shù)板被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等實(shí)驗(yàn)中的細(xì)胞數(shù)量測(cè)定。例如,在研究不同生長(zhǎng)因子對(duì)細(xì)胞增殖的影響時(shí),科研人員需要定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),以繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,評(píng)估生長(zhǎng)因子的作用效果。
細(xì)胞治療:在細(xì)胞治療技術(shù)中,如 CAR-T 細(xì)胞治療、干細(xì)胞治療等,準(zhǔn)確計(jì)數(shù)細(xì)胞是確保治療安全性和有效性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。通過使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板,可以精確控制細(xì)胞的輸入劑量,避免因細(xì)胞數(shù)量過多或過少而導(dǎo)致的治療風(fēng)險(xiǎn)。
藥物研發(fā):在藥物篩選和藥效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞計(jì)數(shù)是評(píng)估藥物對(duì)細(xì)胞毒性和增殖抑制作用的重要指標(biāo)。通過比較藥物處理前后的細(xì)胞數(shù)量變化,可以判斷藥物的活性和作用機(jī)制,為藥物研發(fā)提供重要的數(shù)據(jù)支持。
準(zhǔn)確性高:CHT4-SD100-002 細(xì)胞計(jì)數(shù)板的精密結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)和標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)數(shù)區(qū)域,減少了人為誤差,能夠提供較為準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。通過嚴(yán)格遵循計(jì)數(shù)方法和操作規(guī)范,多次重復(fù)計(jì)數(shù)取平均值,可以進(jìn)一步提高數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。
操作簡(jiǎn)便:該計(jì)數(shù)板的使用方法相對(duì)簡(jiǎn)單,無需復(fù)雜的儀器設(shè)備和專業(yè)技能培訓(xùn),科研人員和技術(shù)人員經(jīng)過短期培訓(xùn)即可掌握操作要點(diǎn)。在日常實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)過程中,能夠快速完成細(xì)胞計(jì)數(shù)工作,提高工作效率。
成本效益好:與一些自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)設(shè)備相比,CHT4-SD100-002 細(xì)胞計(jì)數(shù)板的價(jià)格較為親民,且使用壽命長(zhǎng),維護(hù)成本低。對(duì)于一些預(yù)算有限的實(shí)驗(yàn)室和企業(yè)來說,是一種經(jīng)濟(jì)實(shí)用的細(xì)胞計(jì)數(shù)工具。
主觀性較強(qiáng):在顯微鏡下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),計(jì)數(shù)結(jié)果容易受到操作人員主觀因素的影響,如細(xì)胞識(shí)別能力、計(jì)數(shù)區(qū)域選擇等。不同操作人員對(duì)同一細(xì)胞懸液進(jìn)行計(jì)數(shù),可能會(huì)得到不同的結(jié)果。因此,需要操作人員具備一定的經(jīng)驗(yàn)和熟練的操作技能,并嚴(yán)格按照操作規(guī)范進(jìn)行計(jì)數(shù)。
通量較低:CHT4-SD100-002 細(xì)胞計(jì)數(shù)板一次只能對(duì)少量樣本進(jìn)行計(jì)數(shù),對(duì)于大規(guī)模的細(xì)胞計(jì)數(shù)需求,如高通量藥物篩選實(shí)驗(yàn),操作效率較低。在處理大量樣本時(shí),需要耗費(fèi)較多的時(shí)間和人力。
不適用于特殊細(xì)胞:對(duì)于一些體積較小、形態(tài)不規(guī)則或容易聚集成團(tuán)的細(xì)胞,在顯微鏡下計(jì)數(shù)難度較大,可能會(huì)導(dǎo)致計(jì)數(shù)誤差。此外,對(duì)于一些含有雜質(zhì)或碎片的細(xì)胞懸液,也會(huì)影響細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。在這種情況下,可能需要結(jié)合其他細(xì)胞計(jì)數(shù)方法或?qū)颖具M(jìn)行進(jìn)一步處理。